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Usar hoja de explantes para la transformación de Chrysanthemum morifolium ramat. mediado por Agrobacterium tumefaciens- (Spanish)

Rezvanolsadat Kazeroonian, Amir Mousavi, Sepideh Kalatejari, Masoud Tohidfar

Department of Horticultural Sciences, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran

National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology, Iran

Seed and Plant Improvement Campus, Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran, Karaj, Iran

Key words: Chrysanthemum morifolium, transformation, Agrobacterium tumefaciens, gus reporter gene, leaf explants.

Resumen
6258_6Se llevó a cabo una transformación mediada por Agrobacterium para crisantemo utilizando explantes de hojas de dos cultivares diferentes. Hojas primero se infectaron con la cepa de Agrobacterium tumefaciens LBA4404, dan cobijo a un vector binario pBI121 llevando el gene del reportero GUS y nptII como el gen marcador seleccionable. 30 segundos para la infección de hojas demostró para ser la duración óptima. Se consiguen mejores resultados cuando los explantes fueron cocultivated con a. tumefaciens por dos días. Disparar medio de inducción fue complementado con 7 de mgl-1 de kanamicina y cefotaxima 300 de mgl-1. Plantas transgénicas putativas se obtuvieron después de enraizamiento en MS de 1/2 medio con kanamicina de 7mgl-1 en ausencia de cefotaxima. Eficiencia de transformación de ‘Reagan Elite salmón’ (29.1%) fue mayor que ‘Resomee Splendid’ (9,1%). Presencia del gen gus se verificó con histoquímica GUS ensayo y la polimerasa reacción en cadena (PCR) de plantas transformadas.

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